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第1456章室温
韦伯在实验室里坐了整整一个下午。
他把实验记录本摊在桌上,旁边摆着三台不同品牌的温度记录仪丶一台pH计丶一个细胞计数板,还有一迭刚列印出来的文献。阳光从窗户斜射进来,在桌面上投下一道明亮的光斑,光斑里漂浮着细小的尘埃,像无数正在做布朗运动的微粒。
「培养箱温度波动记录。」他自言自语,在第一页纸上写下标题。
过去三个小时,他每隔十分钟记录一次培养箱的实际温度。设定值是三十七度,但实际读数在三十六点八到三十七点三之间波动。每次开门取放细胞,温度会骤降到三十五度左右,然后需要十五分钟才能恢复到设定值。这十五分钟的低温暴露,对大多数细胞来说无关紧要,但对某些敏感的干细胞分化体系,可能就是致命的干扰。
「但上周做实验的时候,温度波动也是这样的。」韦伯皱着眉头,在纸上画了一条曲线,「如果温度是变量,那上周的数据也应该失败。」
他放下笔,走到细胞培养室,打开培养箱的门。里面摆满了培养皿,像一个个透明的飞碟,整齐地排列在金属架子上。他取出自己的那批干细胞,放在倒置显微镜下观察。
细胞形态正常,贴壁良好,没有明显的污染迹象。但他注意到一个细节:培养皿边缘的细胞密度似乎比中心区域略高一些。这说明在接种的时候,细胞悬液没有充分混匀,导致分布不均匀。
「细胞密度……」韦伯喃喃自语,突然想起什么,快步走回办公桌,翻开实验记录本。
上周那个「漂亮数据」的实验记录上,细胞计数那一栏写的是「1.2×10^6/ml」。而这三次失败的记录,细胞计数同样是「1.2×10^6/ml」。数字相同,但实际操作中,计数误差通常在百分之十到二十之间。如果上周的实际密度是1.0×10^6/ml,而这三次的实际密度是1.4×10^6/ml,那么细胞在接种时的状态就可能完全不同。
「不,不对。」韦伯摇了摇头,「密度差异会影响增殖速度,但不会改变分化方向。条件培养基组和对照组的差异应该仍然存在,只是幅度不同。」
他靠在椅背上,闭上眼睛,在脑海里把整个实验流程重新过了一遍。从细胞复苏到接种,从培养基配制到条件培养基添加,从染色到流式检测……每一个环节都像是电影画面一样在脑海中闪过。
突然,一个画面定格了。
上周做实验的那天上午,他在配制条件培养基的时候,实验室的空调正在维修,室温比平时高了大约三度。他记得自己当时还抱怨过太热,脱掉了白大褂。而这三次重复实验,都是在空调正常运转的情况下做的,室温保持在二十三度。
「室温?」韦伯猛地睁开眼睛,「室温会影响培养基的温度,进而影响细胞在操作过程中的应激反应?」
他立刻打开电脑,搜索文献。十几分钟后,他找到了一篇发表在《细胞报告》上的论文,题目是《环境温度对干细胞命运决定的非预期影响》。论文指出,在细胞接种后的前两个小时,如果培养基温度低于三十五度,会激活一条与应激反应相关的信号通路,这条通路会抑制某些分化程序,同时增强细胞的自我更新能力。
「前两个小时……」韦伯的心跳加速了。上周空调维修,室温二十六度,他在接种细胞的时候,培养基从培养箱取出后在室温下暴露的时间比平时长了几分钟。这几分钟的温差,可能刚好触发了那条应激通路,使得细胞对条件培养基中的因子产生了不同的响应。
「但这只是一个假设。」韦伯强迫自己冷静下来。在科研中,一个漂亮的假设如果没有实验验证,就只是一个故事。他需要设计一个对照实验,专门验证温度暴露时间这个变量。
他看了看时间,下午五点四十。今天已经来不及做验证实验了,细胞需要提前复苏,培养基需要提前配制。他把方案保存好,准备明天一早开始。
走出实验室的时候,韦伯在走廊上碰到了唐顺。
「怎么样?有眉目了吗?」唐顺问。
「有一个假设。」韦伯把温度暴露时间的想法说了一遍。
唐顺听完,沉思了片刻:「即使温度暴露时间是变量,它可能也不是唯一的变量。生物系统的复杂性在于,多个变量之间可能存在交互作用。温度暴露时间可能和细胞代数交互,可能和血清批次交互,可能和培养箱的位置交互。你找到了一个,不代表找到了全部。」
韦伯点点头:「我明白,但科研就是这样,一个一个地排除,一个一个地确认。至少现在有了一个方向,不再是盲人摸象。」
「杨教授呢?」唐顺问。
韦伯说:「下午去神经外科了,龚老师的术后复查,他说晚上回家吃饭,明天上午来讨论未知蛋白的事。」
唐顺拍了拍韦伯的肩膀:「这个实验如果能找出隐藏的变量,你的经验对他们会有很大的帮助。」
韦伯笑了笑,露出一口白牙:「谢谢,我先回去了,明天见。」
杨平赶到神经外科ICU的时候,徐志良正在查房。
龚老师躺在病床上,头部缠着纱布,身上连着各种监护线路。他的眼睛是睁着的,看到杨平进来,嘴角动了动,似乎想笑,但力气不够,只挤出一个小小的表情。
「龚老师,感觉怎么样?」杨平走到床边,俯下身问。
「还好……」龚老师的声音很轻,但很清晰,「就是……头晕……想睡觉……」
「头晕是正常的,术后脑组织还有水肿。」杨平检查了一下他的瞳孔,双侧等大等圆,对光反射灵敏。又让他伸了伸舌头,舌头居中,没有偏斜。「吞咽呢?喝水呛不呛?」
「不呛……刚刚……喝了……一小口……」
杨平点点头,转向徐志良:「术后CT我看了,很好。但延髓手术后的水肿高峰期在术后四十八到七十二小时,现在才是第一天,不能掉以轻心。脱水丶激素丶神经营养的方案要严格执行,有任何异常立即处理。」
徐志良点点头:「我已经安排了专人监护,每小时记录一次生命体徵,呼吸节律监测也开着,一旦出现异常,系统会自动报警。」
「好。」杨平又看了看龚老师,「龚老师,你好好休息,配合治疗。你的手术很成功,病灶完全切除了。等水肿消退,你会感觉越来越好。」
龚老师眨了眨眼睛,表示明白。
杨平走出ICU,在走廊里站了一会儿。
「教授!」徐志良追了出来,「有个事……想跟您……商量。」
「说。」
徐志良顿了顿,说:「我们神经外科……最近收了一个疑难病例,想请您会诊……」
「什么病例?」
「一个……十二岁的……女孩,脑干弥漫性胶质瘤,考虑DIPG。」徐志良的声音低了下来,「家属……不……想放弃,全国各地都……都跑遍了,最后来到我们……这……这……这里。」
「家属什么态度?」杨平问。
徐志良说:「微信聊?」
「好。」杨平点点头,然后回研究所。
徐志良编辑了微信。
「患者家属的态度非常坚决!他们说,哪怕只有百分之一的希望,也要试一试。我查了一下文献,最近有一种新的实验性疗法,叫ONC201,是一种小分子药物,靶向多巴胺受体D2,在部分DIPG患者中显示出了一定的效果。但国内还没有上市,需要走同情用药的程序。」
杨平沉思了片刻。ONC201他知道,这是一种处于临床试验阶段的药物,作用机制不完全清楚,但有一些早期的积极数据。然而,同情用药的程序复杂,伦理审查严格,而且药物本身的效果远未得到证实。
「把病历资料发给我,我看看。另外,通知家属,明天下午我们一起讨论一下,大家一起评估。」杨平回复。
「好,我安排。」
杨平看了看时间,已经六点半了,他赶快下班回家。
小苏的红烧排骨已经出锅了。
杨平推门进去的时候,厨房里弥漫着浓郁的酱香,混合着八角丶桂皮和冰糖的甜香。小苏系着围裙,正在炒最后一道青菜,锅铲翻飞,青菜在锅里发出清脆的声响。
「回来了?」小苏头也不回,「洗手,马上开饭。」
杨平换了鞋,走到厨房门口,从后面轻轻环住她的腰。小苏的肚子已经很明显了,隔着围裙都能感觉到那个圆润的弧度。他把手掌覆上去,果然感到一下轻微的跳动,像一条小鱼在肚子里游动。
「今天动得挺欢。」杨平笑着说。
「可不是,刚才我炒菜的时候,他在里面翻跟头呢。」小苏用胳膊肘轻轻顶了顶他。
杨平松开手,去卫生间洗手。镜子里的自己胡茬已经长出来了,硬硬的,有点扎手。
「明天刮一下吧,几天不刮也不碍事。」他自言自语。
餐桌上已经摆好饭菜。
「神经外科有个术后病人,去看了看。又碰上一个DIPG的病例,和徐志良讨论了一会儿。」杨平夹了一块排骨,肉质酥烂,酱香浓郁,「好吃。」
小苏看着他狼吞虎咽的样子,眼里带着笑意,但眉头却微微皱着:「DIPG?就是上次我们在新闻里看到的那个儿童脑癌?」
「对。」杨平点点头,「那个病很麻烦,但家属不放弃,我们能做的,就是全力以赴。」
小苏沉默了一会儿,然后说:「你也要注意身体,最近事情这么多,别把自己累坏了。」
「一定。」杨平笑了笑。
吃完饭,杨平帮忙一起做家务,然后坐在沙发上边看电视边和小苏聊天。新闻里正在播报一则医疗新闻,说某国批准了一种新的基因疗法,用于治疗罕见病。杨平看了一会儿,觉得没什么新意,便关掉电视,走进书房。
他打开电脑,登录邮箱。格林教授的回覆已经来了,说非常理解他的谨慎,同意先开视频会议,共同通讯作者的事后续再议。会议时间定在下周四晚上九点,考虑到时差,那是波士顿时间周四早上九点。
杨平回复了一个「OK」,然后打开徐志良发来的DIPG病历。
女孩叫林晓雨,十二岁,帝都某重点中学初二学生。三个月前出现走路不稳丶面部不对称的症状,在当地医院做MRI,发现脑桥占位。转到某三甲医院,做了活检,病理确诊为DIPG。之后接受了标准放疗,但肿瘤继续进展。家属拒绝放弃,辗转来到三博医院。
杨平一张张地看着影像资料。最新的MRI显示,脑桥已经明显膨大,肿瘤呈弥漫性浸润,边界不清,几乎占据了整个脑桥的横截面。第四脑室受压变形,脑脊液循环受阻,已经出现了轻度的脑积水。
「典型的DIPG。」杨平在心里下了判断。这种影像学表现,他见过太多次了。
他仔细研究了每一个细节:肿瘤的信号特徵丶增强模式丶扩散受限情况丶波谱分析……
突然,他的目光停留在一张波谱分析的图像上。胆硷峰(Cho)明显升高,N-乙醯天冬氨酸峰(NAA)降低,这是典型的恶性肿瘤表现。但乳酸峰(Lac)也明显升高,这通常提示肿瘤内部存在缺氧和坏死。
「缺氧……」杨平喃喃自语。缺氧的肿瘤微环境,会激活一系列适应性的信号通路,包括HIF-1α通路。而HIF-1α的激活,又会影响肿瘤的代谢丶血管生成丶侵袭性和治疗抵抗性。
K疗法其实可以试一试,在理论上K疗法应该很适合这种肿瘤。
杨平拿起手机打给陆小路,目前K疗法实验室是陆小路主管的实验室之一。
这种病例不用K疗法可惜了。K疗法已经积累了很多病例,其中就有脑干弥漫性胶质瘤,虽然这种病例暂时不多,都是临床试验性质的病例,但是已经证明它对这种肿瘤是有效的。